凝膠過濾層析(Gel filtration chromatography)法又稱為分子篩方法或分子排阻層析(Molecular-exclusion chromatography),主要是根據蛋白質的大小和形狀,即蛋白質的質量進行分離和純化。
凝膠過濾層析是利用具有多孔網狀結構的顆粒的分子篩作用,根據被分離樣品中各組分相對分子質量大小的差異進行洗脫分離的一項技術。一般是大分子先流出來,小分子后流出來。
凝膠過濾層析原理
凝膠過濾層析的優勢:
· 條件溫和,對蛋白活性保持率高;
· 可使用任何緩沖液,也可以把蛋白置換到任何緩沖液中;
· 既可以對標簽蛋白進行純化,也可以對非標簽蛋白進行純化。
凝膠過濾層析的用途:
· 粗分離——脫鹽/交換緩沖液;
· 精細分離——聚集體去除,分離不同大小分子量的蛋白質
· 檢測用途——計算分子量等
常見的凝膠基質有:瓊脂糖凝膠(sepharose)、架橋瓊脂糖凝膠(sepharose CL)、葡聚糖凝膠(sephadex)、聚丙烯酰胺凝膠、聚乙烯醇(TOSHO的Toyopearl)。BioToolomics凝膠過濾層析填料采用的是瓊脂糖凝膠來作為凝膠基質,分為4個系列:
· SepFast系列(未交聯的瓊脂糖)
· SepFast CL系列(交聯瓊脂糖)
· SepFast High Flow系列(高度交聯瓊脂糖)
· SepFast SEC系列(高度交聯的瓊脂糖或多糖復合物)
BioToolomics凝膠過濾層析填料的主要優勢如下:
· 高分辨率
· 高選擇性
· 高回收率
· 高擴展性
· 優異的物理和機械穩定性
· 經濟高效
BioToolomics凝膠過濾層析填料部分產品參數信息:
BioToolomics凝膠過濾層析填料部分產品選擇指南:
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