逆轉錄酶是從RNA模板合成互補DNA鏈(cDNA)過程中的必需試劑。它的主要作用是指導第一鏈cDNA的合成,然后可直接作為PCR, qPCR, LAMP或測序等檢測的模板。
決定最佳逆轉錄酶的幾個關鍵重要特性:
1. RNase H 活性: RNase H(核糖核酸酶H)是一種切割并降解RNA-DNA雜交鏈中RNA鏈的酶,同時可以保持DNA鏈的完整。如果逆轉錄酶的RNA酶H活性過高,則會導致RNA模板的過度降解,引起cDNA合成不完整或效率低下。具有低RNase H活性的逆轉錄酶可以最大限度地減少反應中RNA分子的非特異性降解,提高cDNA合成的特異性和保真度。
2. 持續合成能力: 持續合成能力是指在酶的單個結合事件中摻入的核苷酸數量。持續合成能力強的逆轉錄酶可以在更短的反應時間內合成更長的cDNA 鏈。大多數經過改造的逆轉錄酶具有更強的合成能力(比野生型MMLV逆轉錄酶高65倍)。
3. 熱穩定性: 耐高溫能力是cDNA合成的一個重要方面,因為高溫有助于使具有強二級結構和/或高GC含量的RNA變性,從而實現全長cDNA合成和更高產量。野生型MMLV逆轉錄酶在37°C下表現最佳,而加工改造后的熱穩定性MMLV逆轉錄酶可以承受高達55°C的溫度,而不會對逆轉錄效率產生負面影響。
邁迪安提供了多種不同的逆轉錄酶,每種都有du特的產品特性,例如高溫穩定性或可用于開發常溫穩定檢測的凍干兼容。下面讓我們一起來看看Meridian MMLV 逆轉錄酶的產品列表吧!
邁迪安(Meridian)熱穩定MMLV逆轉錄酶
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
MDX117 | 55C MMLV-RT | 0.05mL;0.2mL 1mL;10mL |
邁迪安(Meridian)可凍干MMLV逆轉錄酶
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
MDX042 | Lyo-Compatible MMLV-RT | 8µL 80µL |
邁迪安(Meridian)含RNA酶抑制劑的MMLV逆轉錄酶
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
MDX043 | RNase-Tolerant MMLV-RT | 200 µL 2 mL 210 mL |
邁迪安(Meridian)MMLV逆轉錄酶
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
MDX044 | MMLV-RT | 200 µL 2 mL |
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